توضیحات
محیط کشت میکروبی (Sabouraud Dextrose Agar (SDA که به نام محیط سابورو دکستروز آگار نیز شناخته میشود، محیطی اسیدی برای کشت مخمر، کپک و قارچ، خصوصاً درماتوفیت ها میباشد. محیط کشت Sabouraud Dextrose Agar (SDA در سال ۱۹۸۲ برای کشت درماتوفیت ها فرموله شد. PH در این محیط کشت به نزدیک ۵٫۶ رسیده است برای رشد قارچ، بهخصوص درماتوفیت ها و البته این مقدار PH کمی هم از رشد باکتریها در نمونههای کلینیکی جلوگیری میکند. پپتون (حاصل از هضم آنزیمی کازئین و هضم آنزیمی بافتهای حیوانی) منبع نیتروژن و ویتامینهای لازم برای رشد میکروارگانیسم در محیط کشت SDA را فراهم میکند. دکستروز بهعنوان منبع کربن و انرژی افزوده میشود. آگار هم عامل جامد کننده در این محیط کشت میباشد.
آمادهسازی محیط SDA
- ۶۵ گرم از محیط را در ۱ لیتر آب مقطر حل کنید و بجوشانید تا کاملاً حل شود.
- در دمای ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید.
- در صورت تمایل به افزودن کلرامفنیکل یا هر آنتیبیوتیک دیگری، پس از خنک شدن محیط و رسیدن دمای آن به ۵۰-۴۵ درجه سانتیگراد، آن را به محیط اضافه کنید.
شرایط نگهداری Sabouraud Dextrose Agar
پودر محیط داخل قوطی کاملاً دربسته و در دمای زیر ۳۰ درجه سانتیگراد و محیط آماده در دمای ۸-۲ درجه سانتیگراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.
فرآیند آزمایش
- نمونه موردنظر را بر روی پلیت کشت دهید.
- پلیتها را در دمای ۲±۲۵ به مدت ۵-۳ روز (برای قارچها در صورت لزوم تا ۳ هفته) گرماگذاری کنید.
نتیجه و تفسیر Sabouraud Dextrose Agar
پس از گرماگذاری، کلنیهای قارچ را از نظر شکل ظاهری کلنیها، خصوصیات میکروسکوپی، سرعت رشد و منبع نمونه کشت شده بررسی کنید. مخمرها توسط بسیاری از تستهای بیوشیمیایی تشخیص داده میشود. تعداد کلنیهای نمونههای پورپلیت شده یا اسپرید شده را شمارش کنید و تعداد آنها را بهصورت تعداد CFU در هر میلیلیتر یا هر گرم نمونه محاسبه کنید. برای بررسی بیشتر، کلنیها را بر روی محیط مناسب آن کشت دهید.
نکات تکمیلی سابورو دکستروز آگار
- امکان دارد pH اسیدی محیط و یا افزودن آنتیبیوتیک به محیط مانع رشد برخی قارچها در آن شود.
- به دلیل تنوع نیازهای غذایی، ممکن است برخی سویهها در این محیط رشد نکنند و یا رشد خوبی نداشته باشند.
- محیط را بیش از حد حرارت ندهید، زیرا به دلیل اسیدی بود pH، آگار آن نرم میشود.
- برخی قارچهای بیماریزا ممکن است تولید اسپورهای عفونی کنند که بهراحتی در محیط پراکنده میشوند. در چنین مواقعی بهتر است آزمایش در زیر هود آزمایشگاهی انجام شود.
کنترل کیفی سابورو دکستروز آگار
- ظاهر محیط دهیدراته: کرم/زردرنگ، پودری و یکنواخت
- ظاهر محیط آماده: به رنگ کهربایی روشن و کمی کدر
- نتیجه کشت باکتری، پس از گرماگذاری در دمای ۲±۲۵ به مدت ۵-۳ روز
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.