توضیحات

محیط کشت Brain Heart Infusion Agar/ آگار عصاره مغز و قلب که به نام محیط کشت BHIA نیز شناخته می شود، محیطی پایه و عمومی جهت کشت طیف وسیعی از ارگانیسم ها مانند باکتری ها، مخمرها و قارچ ها می باشد. محیط کشت میکروبی (Brain Heart Infusion Agar (BHIA یک محیط غنی شده و جامد است که برای کشت باکتری ها، مخمرها و باکتری های پاتوژن فستیدیوس از نمونه های بالینی و غیر بالینی توصیه می شود. این یک محیط عمومی برای جدا سازی اولیه باکتری های هوازی از نمونه های بالینی است. اضافه کردن کلرامفنیکل یا استرپتومایسین یا ترکیبی از جنتامایسین و همراه با ۵-۱۰٪ خون استریل دیفیبرینه برای مهار باکتری ها و جداسازی قارچ پاتوژن سیستمیک توصیه می شود. دکستروز منبع انرژی این محیط است و کلرید سدیم تعادل اسمزی محیط را حفظ می کند در حالیکه فسفات نیتروژن محیط بافری را حفظ میکند.

آماده سازی محیط کشت BHIA

۵۲ گرم از پودر محیط را در یک لیتر آب مقطر حل کرده و کاملا مخلوط کنید.
محیط را به مدت ۲ دقیقه بجوشانید تا کاملا حل شود.
محیط کشت را در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه اتوکلاو کنید.
قبل از استفاده، محیط را هم زده تا رسوبات باقیمانده بصورت یکنواخت در محیط قرار گیرند.

شرایط نگهداری محیط کشت BHIA

پودر محیط داخل قوطی کاملا در بسته و در دمای زیر ۳۰ درجه سانتی گراد و محیط آماده در دمای ۸-۲ درجه سانتی گراد نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.

فرآیند آزمایش

با افزودن خون به محیط کشت پایه، بسیاری از فاکتورهای ضروری رشد برای قارچ های سخت رشد محیا می شود. از آنجایی که پس از تلقیح نمونه به پلیت محیط کشت، بسیاری از ارگانیسم ها نیاز برای کشت اولیه نیاز به دی اکسید کربن دارند، بهتر است پلیت های تلقیح شده در فضایی که دارای ۱۰-۵% دی اکسید کربن است به مدت ۴۸-۲۴ ساعت و در دمای 2±35 درجه سانتی گراد گرماگذاری شوند.

برای جداسازی قارچ ها از نمونه های عفونی، بهتر است در کنار این محیط کشت از محیط کشت غیر انتخابی دیگری نیز استفاده شده و در دمای ۳۰-۲۵ درجه سانتی گراد گرماگذاری شود. همچنین برای جداسازی قارچ های مایکوزیز سیستمیک باید دو سری محیط کشت یکی در دمای 30-25 درجه سانتی گراد و دیگری در دمای ۲±۳۵ درجه سانتی گراد گرماگذاری شود.

نتیجه و تفسیر محیط کشت BHIA

پس از دوره گرماگذاری و رشد قارچ ها، کلنی ها بایستی از لحاظ رنگ و مورفولوژی بررسی شده و برای شناسایی بهتر از تست های بیوشیمیایی و سرولوژیک استفاده شود. تمام کشت ها باید از نظر رشد قارچ ها هفتگی بررسی شده و پلیت های رشد نکرده صرفا پس از ۶-۴ هفته گرماگذاری می توانند منفی گزارش شوند.

از محیط BHI Agar اسلنت شده در لوله، برای کشت و نگهداری کشت های خالص میکروارگانیسم ها استفاده می شود.

کنترل کیفی

ظاهر پودر: کهربایی روشن، پودر یکدست و هوموژن
ظاهر محیط آماده: محلول کهربایی روشن و شفاف
نتیجه کشت باکتری پس از گرماگذاری در دمای ۲±۳۵ درجه سانتی گراد تحت شرایط اتمسفری مناسب تا زمان ۴۸ ساعت

بزرگنمایی تصویر