محیط کشت ویولت رد بایل دکستروز

محیط کشت ویولت رد بایل آگار (VRDBA، VRDB Agar یا Violet Red Bile Dextrose Agar )یک محیط رشد میکروبیولوژیکی است.  می توان از آن در صفحات آگار برای نظارت یا ارزیابی رشد باکتری ها در آزمایشگاه استفاده کرد، به ویژه رشد انتروباکتریاسه، که برای آن انتخابی است.

محیط کشت ویولت رد بایل دکستروز(VRBD) مرک

محیط کشت محیط کشت ویولت رد بایل آگار بنفش قرمز (VRBD) برای تشخیص و شمارش باکتری های گرم منفی مقاوم به صفرا از غذاهایی مانند شیر و لبنیات، محصولات تخم مرغ و لاشه حیوانات است.  علاوه بر این، VRBD Agar برای تشخیص انتروباکتریسه در گوشت و محصولات لبنی استفاده می شود.
از محیط کشت ویولت رد بایل آگار(VRBG) برای بررسی مواد غذایی، خوراک دام و نمونه های محیطی، برای حضور گروه های شاخص مانند کلیفرم ها استفاده کنید. علاوه بر ارائه شواهدی مبنی بر بهداشت و ایمنی مواد غذایی، گروه های شاخص معیاری از کیفیت مواد غذایی و پتانسیل فساد ارائه می دهند.  یکی از رایج‌ترین گروه‌های باکتریایی که به‌عنوان ارگانیسم‌های شاخص در صنایع غذایی به کار می‌روند، کلیفرم‌ها هستند که می‌توان آن‌ها را به عنوان زیرگروهی در انتروباکتریاسه در نظر گرفت. با این حال، در تلاش برای بهبود ارزیابی ایمنی و کیفیت مواد غذایی توسط صنایع غذایی، به جای محدود کردن آزمایش‌ها به کلیفرم‌ها، حرکتی به سمت آزمایش کل انتروباکتریاسه صورت گرفته است.
انتروباکتریاسه ها به سرعت گلوکز را تخمیر می کنند و بنابراین pH محیط را کاهش می دهند که به دلیل گنجاندن نشانگر قرمز خنثی و کریستال بنفش در محیط، کلونی های رنگی بنفش/صورتی ایجاد می کند.  این کلنی ها معمولا توسط هاله های بنفش نمک های صفراوی رسوب شده احاطه شده اند.  کریستال بنفشه و نمک های صفراوی رشد فلور گرم مثبت را مهار می کنند.
در غذاهای فرآوری شده، به ویژه غذاهایی که تحت عملیات حرارتی قرار می گیرند، این موجودات می توانند نشانه قابل اعتمادی از شکست فرآیند، کم فرآوری یا آلودگی پس از فرآوری ارائه دهند.

نحوه‌ی تهیه و تولید محیط کشت ویولت رد بایل آگار: 
به دلیل گنجاندن نشانگر قرمز خنثی و بنفش کریستالی در محیط کشت انتروباکتریاسه، کلونی های صورتی ارغوانی را تشکیل می دهند.
Mossel آگار لاکتوز صفراوی بنفش قرمز را با افزودن گلوکز اصلاح کرد تا بازیابی همه انتروباکتریاسه ها را بهبود بخشد. فرایند بعدی Mossel و Cowell  نشان داد که لاکتوز را می توان حذف کرد و در نتیجه فرمولاسیونی به نام VRBGA ایجاد شد.

ویژگی های محیط کشت صفراوی قرمز بنفش (VRBD)

• PH خنثی
• محیط کشت انتخابی برای باکتری های گرم منفی مقاوم به صفرا
• حاوی کریستال ویولت و نمک های صفراوی به عنوان یک عامل بازدارنده

محیط کشت ویولت رد بایل کیولب

آگار صفراوی قرمز بنفش (VRB) یک محیط انتخابی است که بری شناسایی و شمارش میکروارگانیسم های کلیفرم تخمیر کننده لاکتوز استفاده می شود. گروه کلیفرم شامل چندین جنس باکتری متعلق به خانواده انتروباکتریاسه است. تعریف تاریخی این گروه بر اساس روش مورد استفاده برای تشخیص، یعنی تخمیر لاکتوز بود. این گروه به عنوان کلیه باکتری های هوازی اختیاری و بی هوازی، گرم منفی، غیر اسپور ساز و میله ای شکل تعریف می شود که لاکتوز را با تشکیل گاز و اسید ظرف 48 ساعت در دمای 35 درجه سانتی گراد تخمیر می کنند. این محیط برای آنالیز میکروبیولوژیکی شیر و سایر محصولات لبنی و همچنین برای بررسی آب توصیه می شود. این محیط حاوی نمک های صفراوی و کریستال بنفش است که به عنوان عوامل بازدارنده در برابر برخی میکروارگانیسم های گرم مثبت، به ویژه استافیلوکوک ها عمل می کند. قرمز خنثی به عنوان نشانگر pH استفاده می شود. تجزیه لاکتوز به اسید با نشانگر PH قرمز خنثی که رنگ آن را به قرمز تغییر می دهد و با رسوب اسیدهای صفراوی نشان می دهد. میکروارگانیسم‌های تخمیر کننده لاکتوز کلنی‌های صورتی تا قرمز تولید می‌کنند که معمولاً توسط ناحیه‌ای قرمز رنگ از صفرای رسوب‌شده احاطه شده‌اند. میکروارگانیسم هایی که لاکتوز را تخمیر نمی کنند کلنی های بی رنگ تولید می کنند. بیل آگار قرمز بنفش برای شمارش کلیفرم ها در مواد غذایی و لبنیات در محیط آزمایشگاهی استفاده می شود. بیل آگار قرمز بنفش برای استفاده در تشخیص بیماری یا سایر شرایط در انسان در نظر گرفته نشده است و مطابق با انجمن بهداشت عمومی آمریکا (APHA) است. گروه کلیفرم باکتری ها شامل باسیل های هوازی و بی هوازی اختیاری، گرم منفی و غیر اسپورساز می باشد. کلیفرم ها لاکتوز را تخمیر می کنند و در 48 ساعت در دمای 35 درجه سانتی گراد اسید و گاز تشکیل می دهند. اعضای انتروباکتریاسه اکثریت گروه را تشکیل می دهند، اما سایر ارگانیسم های تخمیر کننده لاکتوز نیز ممکن است شامل شوند.

ویژگی های محیط کشت ویولت رد بایل
روش‌هایی برای شناسایی، شمارش و شناسایی احتمالی کلیفرم‌ها در آزمایش غذاها و محصولات لبنی استفاده می‌شود. یکی از روش‌های انجام آزمایش احتمالی برای کلیفرم‌ها از Violet Red Bile Agar (VRBA) استفاده می‌کند. اگر کلنی‌های کلیفرم معمولی ظاهر شوند، برای تأیید شناسایی آنها به عنوان کلیفرم، آزمایش بیشتری انجام می‌شود. کلنی‌های کلیفرم PH محیط را کاهش می‌دهند و متعاقباً باعث می‌شوند کلنی‌هایشان قرمز به نظر بیایند (رنگ قرمز خنثی) و نمک‌های صفراوی را رسوب دهند. آگار صفرا قرمز بنفش (VRB) برای شمارش باکتری های گروه coli-aerogenes طراحی شده است که از فرمول اصلی MacConkey مشتق شده است. این بر استفاده از اجزای بازدارنده انتخابی کریستال بنفش و نمک های صفراوی و سیستم نشانگر لاکتوز و قرمز خنثی متکی است. بنابراین، رشد بسیاری از ارگانیسم‌های ناخواسته سرکوب می‌شود، در حالی که می‌توان به طور آزمایشی باکتری‌های مورد نظر را شناسایی کرد. ارگانیسم هایی که به سرعت به لاکتوز حمله می کنند، کلنی های بنفش رنگی تولید می کنند که توسط هاله های بنفش احاطه شده اند. تخمیر کننده ها یا تخمیر کننده های لاکتوز دیررس کلنی های کم رنگ با مناطق سبز رنگ تولید می کنند. برخی دیگر از باکتری‌های گرم منفی مرتبط ممکن است رشد کنند، اما ممکن است با روش پوشش سرکوب شوند. انتخاب پذیری را می توان با انکوباسیون در شرایط بی هوازی و در دماهای بالا نیز افزایش داد. آگار VRB از پپتون، عصاره مخمر، کلرید سدیم، لاکتوز، نمک های صفراوی، کریستال بنفش، قرمز خنثی، آگار و آب مقطر یا دیونیزه تشکیل شده است. این فصل همچنین آماده سازی VRB agar را شرح می دهد.

ویژگی های محیط کشت صفراوی قرمز بنفش (VRBD)

• حاوی نمک های صفراوی
• مهار باکتری های گرم مثبت

استفاده از محیط کشت صفرا قرمز بنفش (VRBD)

• مناسب برای رشد باکتری های اشریشیا کلی، سالمونلا و استافیلوکوکوس اورئوس

کاربرد های محیط کشت ویولت رد بایل
بیل آگار قرمز بنفش برای تشخیص و تعیین کلیفرم ها در غذا، شیر، آب و سایر مواد بهداشتی استفاده می شود. این یک محیط انتخابی است که رشد کلیفرم های تخمیر کننده لاکتوز را تشخیص می دهد. قرمز خنثی در این فرمولاسیون به عنوان نشانگر pH عمل می کند، در حالی که کریستال ویولت و نمک های صفراوی رشد میکروارگانیسم های گرم مثبت را مهار می کنند. کلنی‌های کلیفرم PH محیط را کاهش می‌دهند و متعاقباً باعث می‌شوند کلنی‌هایشان قرمز به نظر بیایند (رنگ قرمز خنثی) و نمک‌های صفراوی را رسوب دهند. پانکراس دایجست ژلاتین و عصاره مخمر نیتروژن، ویتامین ها، مواد معدنی و اسیدهای آمینه ضروری برای رشد باکتری ها را فراهم می کند. آگار عامل ژله کننده است. لاکتوز کربوهیدرات های قابل تخمیر است و کلرید سدیم الکترولیت های ضروری را تامین می کند و تعادل اسمزی را حفظ می کند.

محیط کشت VRBD

محیط کشت VRBD یا محیط کشت VRBD که به اختصار Violet Red Bile Dextrose نامیده می شود، نوع دیگری از محیط کشت است که در بازار مواد شیمیایی به فروش می رسد. این محیط نیز مانند سایر محیط ها دارای خواص منحصر به فردی است که می توان از آن در محیط کشت سازگار VRBD EP, USP, JP برای بررسی میکروبیولوژیکی محصولات غیر استریل استفاده کرد.

بیشتر به عنوان جدا کننده و  شمارش  سازی انتروباکتریاسه می باشد.
در اطراف خود دارای کلنی قرمز رنگ می باشند که هاله های تیره ای دارند این هاله ها بر اثر رسوب نمک صفراوی تشکیل شده که به احتمال زیاد انتروباکتریاسه می باشد.
اگر باکتری ها درون این محیط کشت شوند رشد کلنی رنگ سفید قهوه ای تشکیل می شود که فاقد هاله شفاف می باشد هرچند باکتری ها تولید و رشد نمی ‌شوند نتیجه کشت باکتری تنها در اثر گرما گذاری قابل نمایش می باشد.
به صورت محیط کشت میکروبیولوژیکی قابل نمایش  می باشد که پی اچ نهایی آن  بستگی به دمای معیین شده می باشد.

فرایند آزمایش محیط کشت VRBD

بیشتر در روش پورپلیت قابل استفاده می ‌باشد که روش استاندارد لایه ای آن بیشتر به کار می رود.
از نظر ظاهری یک محیط دهیدراته صورتی می‌باشد که اغلب به صورت پودری است  حد‌قل  زمان مورد نیاز برای نتیجه گیری کشت محیط 18 الی  24 ساعت می باشد.

محیط کشت Violet Red Bile Dextrose

بنفشه و نمک های صفراوی بلورهای فلور باکتریایی مرتبط را مهار می کنند. تخریب گلوکز با تولید اسید همراه است که با تغییر رنگ به قرمز توسط مناطقی از اسیدهای صفراوی رسوبی در اطراف کلنی ها مشخص می شود. همه انتروباکتریاسه ها شناسایی می شوند زیرا همگی گلوکز را به اسید تبدیل می کنند. با این حال، محیط کشت برای این موجودات خیلی خاص نیست زیرا برخی از باکتری های مرتبط دیگر نیز این واکنش ها را نشان می دهند. هضم آنزیمی بافت حیوانی منابع کربن و نیتروژن را برای رشد فراهم می کند و عصاره مخمر در درجه اول ویتامین های B کمپلکس را فراهم می کند.