محیط کشت شکلات آگار Chocolate Agar مرک
شکلات آگار اساساً همان آگار خون است با این تفاوت که در حین آماده سازی گلبول های قرمز وقتی به پایه آگار مذاب اضافه می شوند لیز می شوند. در نتیجه، لیز سلولی مواد مغذی داخل سلولی مانند هموگلوبین، همین (فاکتور X) و کوآنزیم نیکوتین آمید آدنین دی نوکلئوتید (NAD یا فاکتور V) را در آگار آزاد می کند که توسط باکتری های سخت گیر استفاده می شود. لیز گلبول قرمز زمانی که آماده می شود رنگ قهوه ای شکلاتی به محیط می دهد که نام آگار از آن گرفته شده است.
محیط کشت شکلات آگار (Chocolate Agar) کیولب
شایع ترین پاتوژن های باکتریایی که برای رشد به این محیط غنی شده نیاز دارند عبارتند از نایسریا گونوره و گونه های هموفیلوس. پایه آگار شکلاتی، با افزودن مکمل ها، رشد عالی ارگانیسم های سریع را بدون رشد بیش از حد توسط موجودات آلوده می دهد. هضم کازئین و بافت حیوانی که ارگانیسم را با مواد مغذی نیتروژن دار، اسیدهای آمینه و سایر عناصر ضروری برای رشد ارگانیسم ها تامین می کند. از آنجایی که گونه های نایسریا به مواد سمی مانند اسیدهای چرب بسیار حساس هستند، از این رو افزودن نشاسته ذرت به خنثی کردن متابولیت های سمی احتمالی کمک می کند، در حالی که فسفات پتاسیم به حفظ pH یکنواخت در طول رشد کمک می کند. کلرید سدیم تعادل اسمزی را حفظ می کند و در نتیجه یکپارچگی سلول ها را حفظ می کند.
ویژگی های محیط کشت شکلات آگار
شکلات آگار نیز به عنوان یکی از انواع صفحه خون آگار در نظر گرفته می شود که حاوی گلبول های قرمز خون است که با حرارت آهسته تا 80 درجه سانتی گراد لیز شده اند. گرما آنزیم هایی را غیرفعال می کند که در غیر این صورت می توانند NAD را تجزیه کنند. مکمل های اضافه شده فاکتور X (از هموگلوبین) و فاکتور V (از مکمل رشد) مورد نیاز ارگانیسم های سخت گیر را فراهم می کنند. همچنین می توان برخی تغییرات را برای رشد ارگانیسم خاص انجام داد. Thayer-Martin Media یک آگار شکلاتی است که با ونکومایسین، نیستاتین و کولیستین برای مهار فلور طبیعی از جمله نایسریا غیر بیماریزا برای جداسازی انتخابی N. gonorrhoeae و N. meningitidis تکمیل شده است. آگار شکلاتی مکمل باسیتراسین یک محیط انتخابی است که برای بهبود جداسازی اولیه H. influenzae از نمونه های حاوی فلور مخلوطی از باکتری ها و یا قارچ ها استفاده می شود. شکلات آگار مکمل با پایه GC و مکمل رشد اصلاح دیگری است که از نیازهای رشد ویژه (همین و NAD) مورد نیاز برای جداسازی ارگانیسم های سختگیر مانند H. influenzae در دمای 35-37 درجه سانتیگراد در اتمسفر CO2 5٪ انکوبه می شود.
فروش محیط کشت شکلات آگار (Chocolate Agar).
محیط کشت شکلات آگار یک محیط کشت غنی برای رشد باکتری های بیماری زا در آزمایشگاه های میکروبیولوژی و حاوی فاکتورهای رشدی مانند نیکوتین آمید آدنین دی نوکلئوتید است.
ویژگی های محیط کشت شکلات آگار (Chocolate Agar).
- حاوی گلبول های قرمز لیز شده
- حاوی مواد مغذی مورد نیاز برای رشد است
محیط کشت شکلات آگار مرک
شکلات آگار (CAP یا CHOC) یک محیط غیر انتخابی و غنی شده است که برای جداسازی و شناسایی پاتوژن های سخت گیر استفاده می شود. این نام از این واقعیت گرفته شده است که لیز RBC به محیط رنگ قهوه ای شکلاتی می دهد. آگار شکلاتی آماده شده در خانه، آگار خون اصلاح شده است که برای لیز کردن RBC گرم می شود. لیز RBC مواد مغذی داخل سلولی مانند هموگلوبین، هیمین (فاکتور X) و کوآنزیم نیکوتین آمید آدنین دی نوکلئوتید (NAD یا فاکتور V) را برای استفاده توسط باکتری‌های سختگیر در آگار آزاد می‌کند. پپتون نیتروژن، اسیدهای آمینه و سایر عناصر ضروری برای رشد را برای ارگانیسم فراهم می کند، کلرید سدیم تعادل اسمزی را حفظ می کند و آگار به عنوان یک عامل انجماد عمل می کند. در آماده سازی تجاری، هضم کازئین و بافت حیوانی نیتروژن، اسیدهای آمینه و سایر عناصر را برای ارگانیسم فراهم می کند. از آنجایی که گونه های نایسریا به مواد سمی مانند اسیدهای چرب بسیار حساس هستند. نشاسته ذرت برای خنثی کردن متابولیت های سمی احتمالی اضافه می شود. فسفات پتاسیم به حفظ pH یکنواخت در طول رشد کمک می کند. محلول هموگلوبین فاکتور X (همین) مورد نیاز گونه های هموفیلوس را فراهم می کند و غنی سازی ایزو ویتکس فاکتور V (دی نوکلئوتید نیکوتین آمید) و سایر ترکیبات پیچیده را فراهم می کند که رشد گونه های نایسریا را افزایش می دهد.
ویژگی های محیط کشت شکلات آگار مرک
ترکیبات آگار شکلاتی مانند بلاد آگار است. تنها تفاوت این است که آگار خون در یک حمام آب گرم می شود تا آگار شکلاتی آماده شود. با این حال، محیط آگار شکلاتی موجود در بازار، ترکیب متفاوتی دارد و نیازی به اضافه کردن خون ندارد. از آنجایی که شکلات آگار یک محیط غنی شده است، به راحتی آلوده می شود. فقط استفاده از آگار شکلاتی، تمایز ارگانیسم های غیر بیماری زا از موجودات بیماری زا را دشوار می کند، زیرا موجودات قبلی باکتری های بیماری زا را بیش از حد رشد می کنند. آگار شکلاتی غلظت آگار کاهش یافته است، بنابراین سطح بشقاب شکننده و مستعد خراش در هنگام رگه شدن است. شکلات آگار با باسیتراسین: این اصلاح به عنوان یک محیط انتخابی برای بهبود جداسازی اولیه H. influenzae از نمونه هایی مانند خلط که حاوی فلور مخلوطی از باکتری ها و/یا قارچ ها است، استفاده می شود. آگار شکلاتی با پایه GC و مکمل رشد: این نوع شکلات آگار برای حمایت از نیازهای رشد ویژه (همین و NAD) مورد نیاز برای جداسازی هموفیلوس spp استفاده می شود. هنگامی که در دمای 35-37 درجه سانتیگراد در اتمسفر 5٪ CO2 انکوبه می شود.
فروش محیط کشت شکلات آگار
محیط کشت پایه آگار شکلات گرم شده و پس از استریل شدن به آن خون اضافه می شود. دمای بالای محیط کشت گلبول های قرمز را از بین می برد و محتوای داخل سلول ها باعث تیره شدن محیط کشت و به رنگ شکلاتی دیده می شود. در این محیط، باکتری هایی که با فرم روبرو هستند، به دلیل وجود مواد مغذی و هموگلوبین که از گلبول های قرمز تخریب شده منشأ می گیرند، به راحتی کشت می شوند.
ویژگی های محیط کشت شکلات آگار
- حاوی گلبول های قرمز تخریب شده است
- حاوی مواد مغذی بالایی است
- در دمای 4 تا 12 درجه سانتیگراد نگهداری شود
محیط کشت Chocolate agar
محیط کشت شکلات آگار نوع دیگری از محیط کشت است که در بازار به فروش می رسد و به طور گسترده مورد استفاده قرار می گیرد، اما برای بسیاری از افراد این محیط کشت شباهت زیادی به محیط کشت بلاد آگار دارد، به عبارت دیگر بسیاری تصور می کنند که این محیط کشت همان محیط کشت است. محیط کشت محیط بلاد آگار اما تفاوت هایی بین محیط آگار شکلاتی و محیط بلاد آگار که در اصل همان محیط بلاد آگار است وجود دارد.با این تفاوت که در حین آماده سازی، گلبول های قرمز خون وقتی به پایه آگار اضافه می شوند، لیز می شوند و در نتیجه لیز سلولی مواد مغذی داخل سلولی مانند هموگلوبین و مم (فاکتور X) و کوآنزیم نیکوتین آمید آدنین دی نوکلئوتید آزاد شده در آگار انجام می شود. توسط باکتری های سریع استفاده می شود. لیز گلبول های قرمز در نهایت به محیط رنگ قهوه ای شکلاتی می دهد. شایع ترین پاتوژن های باکتریایی که برای رشد به این محیط غنی شده نیاز دارند نایسریا گونوره و هموفیلوس هستند.
طرز تهیه و ساخت محیط کشت شکلات آگار
- علاوه بر محلول هموگلوبین، مواد را به آب مقطر اضافه کرده و حجم آن را به 500 میلی لیتر برسانید.
- خوب مخلوط کنید. به آرامی حرارت دهید تا به جوش بیاید.
- اتوکلاو در دمای 15 تا 21 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه.
- تا دمای 45 تا 50 درجه سانتی گراد خنک شود.
- 500 میلی لیتر محلول هموگلوبین استریل را اضافه کنید و خوب مخلوط کنید.
- در ظروف پتری استریل بریزید یا در لوله های استریل توزیع کنید.
اجزای محیط کشت Chocolate agar
موارد استفاده از شکلات آگار
این ماده در جداسازی و تکثیر میکروارگانیسم های سریع به ویژه گونه های هموفیلوس و نیسریا کاربرد دارد.
همچنین لازم به ذکر است که یکی دیگر از کاربردهای این محیط جداسازی نایسریا گونوره از موارد مزمن و حاد عفونت های گنوکوکی است.
نتیجه تفسیر شکلات آگار
Neisseria gonorrhoeae کلنی های مخاطی کوچک خاکستری تا سفید را با قوام صاف و حاشیه های مشخص تشکیل می دهد.
نایسریا مننژیتیدیس کلنی های بزرگ تری تولید می کند که به رنگ خاکستری مایل به آبی، مخاطی، گرد، محدب، صاف، مرطوب و براق با لبه های کاملا مشخص هستند.
هموفیلوس آنفولانزا کلنی های کوچک بی رنگ و مرطوب با بوی خاص تولید می کند.
کاربردهای محیط کشت شکلات آگار
- کشت باکتری هموفیلوس آنفلوآنزا
- پرورش بسیاری از باکتری های هوازی
- رشد بسیاری از میکروارگانیسم هایی که رشد آنها دشوار است
خرید محیط کشت شکلات آگار
کاربرد های محیط کشت شکلات آگار مرک
برای جداسازی ارگانیسم‌های سختگیر مانند H. influenzae، N. gonorrhoeae و N. meningitidis از نمونه‌های بالینی مختلف، که به تشخیص بیماری کمک می‌کند. شکلات آگار با باسیتراسین به عنوان یک محیط انتخابی برای غربالگری H. influenzae از نمونه ها عمل می کند. خلط حاوی فلور مخلوطی از میکروارگانیسم ها
کاربردهای محیط کشت شکلات آگار (Chocolate Agar) Kiolub
- تشخیص و رشد سریع باکتری هایی مانند نایسریا، مننژیت
- بستر مناسب برای رشد باکتری هایی که به سختی رشد می کنند
توصیه های محیط کشت شکلات آگار
توصیه می شود برای شناسایی کامل، آزمایشات بیوشیمیایی و/یا سرولوژیکی اضافی روی کلنی های جدا شده از کشت خالص انجام شود. شکلات آگار یک محیط غنی شده است، بنابراین موجودات غیر بیماری زا ممکن است باکتری های بیماری زا را بیش از حد رشد دهند. اگر جداسازی N. gonorrhoeae مورد نظر است، باید یک محیط انتخابی مانند Thayer Martin Agar، Modified به موازات این فرمول غیر انتخابی استفاده شود. هموگلوبین رسوبی ممکن است به صورت لکه های تیره روی یا در محیط ظاهر شود و بر عملکرد محیط تأثیری ندارد. وجود یا عدم وجود N. gonorrhoeae در یک نمونه وجود احتمالی سایر ارگانیسم های بیماری زا را رد نمی کند.
کاربرد های محیط کشت شکلات آگار
از آن در جداسازی و پرورش میکروارگانیسم های سختگیر، به ویژه گونه های هموفیلوس و نایسریا استفاده می شود. برای جداسازی نایسریا گونوره از موارد مزمن و حاد عفونت های گنوکوکی استفاده می شود.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.