رنگ آمیزی زیل نلسون، متداول ترین روش رنگ امیزی در آزمایشگاه های مایوباکتریولوژی است. این روش برای باکتری های اسید فست مانند مایکوباکتریوم توبرکلوزیس (TB) استفاده میشود.
ارگانیسم های مایکوباکتریوم و نوکاردیا به دلیل داشتن مقدار زیادی لیپید و اسید مایکولیک در دیواره خود با رنگ آمیزی گرم به سختی به صورت گرم + ظاهر شده و یا رنگ نمی‌گیرند .
از آنجا که مایکوباکتریوم با قرار گیری در معرض محلول های اسیدی رنگ را درون خود حفظ میکنند، آن را در دسته باکتری های اسید فست قرار میدهند.
از این باکتری‌ها مایکوباکتریوم توبرکلوزیس (عامل سل) و مایکوباکتریوم لپره (عامل جذام) از همه معروف تر هستند. این باکتری ها توسط رنگ آمیزی گرم رنگ نمی‌گیرند.
مراحل رنگ آمیزی
برای رنگ آمیزی زیل نلسون از سه محلول کربول فوشین، اسید الکل برای رنگ بری و متیلن بلو استفاده می کنیم.
بعد از فیکس کردن نمونه، روی لام را با رنگ کربول فوشین آغشته می کنیم . با استفاده از پنبه اغشته با الکل سطح زیری لام را حرارت میدهیم .
حرارت تا زمانی ادامه پیدا می کند که بخار از روی لام متصاعد شود. بعد از حرارت لام را به مدت 5دقیقه در هوای آزاد قرار میدهیم. در این مرحله تمام آرتیفکت ها ، باسیل ها و سایر مواد موجود در لام رنگ امیزی می شوند .
از آنجا که دیواره این ارگانیسم ها بسیار لیپیدی است، بنابراین رنگ نمیتواند وارد دیواره باسیل شود. با حرارت نفوذ رنگ به داخل باسیل ها را افزایش می دهیم . بعد از 5دقیقه، با آب معمولی لام را شستشو و آب گیری می کنیم. سپس با اسید الکل 3% رنگ بری را انجام می دهیم .
بعد از این مرحله در اتمام برای افزایش کنتراست از یک رنگ زمینه ای مانند متیلن بلو و یا مالاشیت گرین استفاده می کنیم. مدت زمان لازم برای متیلین بلو 1 دقیقه است. در مرحله آخر هم لام را خشک کرده و در زیر میکروسکوپ با عدسی 100 بررسی می کنیم .
باکتری اسید فست به رنگ قرمز روشن و زمینه آبی کمرنگ میشود.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.